各種プロトプラストへの遺伝子導入条件の検討（８０）
| 課題番号 | 1992003182 |
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| 研究機関名 | 九州農業試験場（九農試） |
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| 研究期間 | 継Ｓ６３〜Ｈ０３ |
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| 年度 | 1992 |
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| 研究問題 | 暖地農業研究の展開を支える基盤的技術の開発 |
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| 大課題 | 遺伝資源の評価と利用による生物機能の開発 |
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| 中課題 | 遺伝子工学、細胞工学等による生物機能の開発 |
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| 小課題 | 各種プロトプラストへの遺伝子導入条件の検討（８０） |
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| 摘要 | サツマイモ（品種、中支８号）の懸濁培養細胞からプロトプラストを調製し、５×１０５／ｍｌの濃度でエレクトロポレーションに供試した。ハイグロマイシン耐性遺伝子（ＨＰＴ）をもつプラスミド、ｐｕＣ１９−ＨＰＴ、及びβ−グルクロニダーゼ（ＧＵＳ）をもつプラスミドｐＢＩ２２１をプロトプラストと混ぜ合わせ、０．７５ＫＶ／ｃｍ、１００μＦＤ、１０ミリ秒の条件でエレクトロポレーションを行った。その後プロトプラストをハイグロマイシン存在下で培養し、カルスを得た。このカルスよりＤＮＡを抽出し、適当な制限酵素で処理した後、ＨＰＴをプローブにしてサザンハイブリダイゼーションを行った。その結果ハイグロマイシンで生育してくるカルスＤＮＡにはＨＰＴ遺伝子が導入されていることを確認することができた。 |
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| 研究分担 | 作物開発・育種工学研 |
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| パーマリンク | https://agriknowledge.affrc.go.jp/RN/3030031167 |
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| 収録データベース | 研究課題データベース |
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