家畜におけるｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーション技術の開発（２）
| 課題番号 | 1992000783 |
|---|
| 研究機関名 | 畜産試験場（畜試） |
|---|
| 研究期間 | 完Ｈ０１〜Ｈ０３ |
|---|
| 年度 | 1992 |
|---|
| 研究問題 | 家畜・家禽等の生物機能の遺伝的解明とその育種技術への応用 |
|---|
| 大課題 | 家畜・家禽等の遺伝情報発現機構の解析 |
|---|
| 中課題 | 染色体・遺伝子の構造の解析 |
|---|
| 小課題 | 家畜におけるｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーション技術の開発（２） |
|---|
| 摘要 | ｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーションを遺伝子地図の解析に利用していくことを目的として、新たな手法の開発を行ってきた。遺伝子地図解析には解像度の高いｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーションが要求されることから、従来のアイソト−プ法に替えて、化学標識法を用いることにした。この方法はまだ感度が十分ではないため、感度を向上させる方法を開発することを第一の目標においた。まず、ハイブリダイゼーション時のバックグラウンドを抑える為、ブロッキング剤の検討を行った。その結果、ブロッキング剤として、スキムミルクが適していることが判った。また、同時に、ビオチン標識法を検討し、当初の１０倍程度の感度を得る事が出来た。さらに、検出時の光学系の改良を行った。即ち、ビオチン標識法で得られるハイブリダイゼーション・シグナル（反応によって沈着した化学物質）の吸収光を透過させるバンドパスフィルタ−を顕微鏡に装着し、検出感度を約３倍向上させた。その結果、４５キロ塩基対の配列であれば、その染色体上の位置特定が可能となった。 |
|---|
| 研究分担 | 育種・遺子機能研 |
|---|
| パーマリンク | https://agriknowledge.affrc.go.jp/RN/3030032414 |
|---|
| 収録データベース | 研究課題データベース |
|---|
