魚類のミトコンドリアＤＮＡにおける多型検出プローブの作成（８８）
| 課題番号 | 1992005660 |
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| 研究機関名 | 養殖研究所（養殖研） |
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| 研究期間 | 完Ｈ０１〜Ｈ０３ |
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| 年度 | 1992 |
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| 研究問題 | 先端技術の導入による新しい増養殖手法の開発 |
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| 大課題 | 遺伝子操作 |
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| 中課題 | 遺伝子のクローニング |
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| 小課題 | 魚類のミトコンドリアＤＮＡにおける多型検出プローブの作成（８８） |
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| 摘要 | 本研究はＰＣＲ法の有効性の検討に基づいてミトコンドリア（ｍｔ）ＤＮＡの非放射性プローブを作成し、魚類の遺伝系統の解明に資する。元年度はニジマス肝臓から閉環状ｍｔＤＮＡを精製してクローニングし、制限酵素地図を作成した。２年度はｍｔＤＮＡの多型の検出のためアルビノ・ニジマスでの塩基配列を決定してＰＣＲ用プライマーを作成し、２系統のニジマスと、アマゴおよびサクラマスより粗抽出したｍｔＤＮＡでＰＣＲ反応を調べて種内および種間で塩基配列の多型を見いだし、ＰＣＲ法の有効性を確認した。３年度はニジマスＰＣＲプライマーの使用可能魚種を広げるため、コドンの縮重を考慮した混合プライマーを作成し、サケ・マス類以外に１０魚種でＰＣＲ産物を得た。次にＰＣＲダイレクトシーケンシングによりサクラマスで９４４塩基の配列を得、塩基置換のデータを基に他のサケ・マス類との遺伝的距離を求め、サクラマス、ニジマス、ギンザケ、ベニザケの遺伝系統が互いに進化的にほぼ等距離であること等を明らかにした。今後は別の領域のＰＣＲプライマーを作成し、ＤＮＡプローブとしてのより効果的な利用を図ることが必要である。 |
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| 研究分担 | 栄養代謝・代謝研 |
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| パーマリンク | https://agriknowledge.affrc.go.jp/RN/3030033385 |
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| 収録データベース | 研究課題データベース |
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