酵素によるガラクトシル転移とオリゴ糖合成の機構解明（１９３）
| 課題番号 | 1995003828 |
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| 研究機関名 | 食品総合研究所（食総研） |
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| 研究期間 | 延Ｈ０３〜Ｈ０９ |
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| 年度 | 1995 |
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| 研究問題 | 生物変換機能の解明及び利用 |
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| 大課題 | 微生物・酵素等の利用技術の開発 |
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| 中課題 | 酵素利用技術の改良・開発 |
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| 小課題 | 酵素によるガラクトシル転移とオリゴ糖合成の機構解明（１９３） |
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| 摘要 | ５年度までにＣｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｌｂｉｄｕｓ Ｂ−１４ａ株が２種類のベーターガラクトシダーゼ（β−ＧＬ１、高糖転移性、およびβ−ＧＬ２、低糖転移性）を生産することを見いだし、前者（β−ＧＬ１）について酵素の基礎的な性質、特に糖の転移様式の一端を明らかにした。６年度は後者（β−ＧＬ２）について精製ならびに性質の解明を行い、両酵素の酵素・蛋白質レベルでの異同を検討した。菌体抽出液を硫安分画後、イオン交換クロマト等によって精製した結果、β−ＧＬ２は約１４０倍（活性収率８％）に精製された。本酵素の分子量は約８０，０００（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）、至適反応温度およびｐＨはそれぞれ４５゜Ｃ、７．０であった。β−ＧＬ１よりも熱、ｐＨに不安定であり、Ｍｇ２＋、Ｍｎ２＋、Ｃａ２＋、Ｆｅ２＋によって活性化され、Ｃｕ２＋、Ｈｇ２＋、ＥＤＴＡ、２−ＭＥ等によって阻害された。ＯＮＰＧを基質としたときのＫｍは０．３９ｍＭ、Ｖｍａｘは２７．１２μｍｏｌであり、β−ＧＬ１と比較するとＫｍで二桁、Ｖｍａｘでは一桁低かった。また、β−ＧＬ１が各種単糖、二糖を受容体としてガラクトシル基を転移するのに対し、β−ＧＬ２はほとんど転移活性を示さず、活性の発現様式に大きな差があることが示唆された。 |
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| 研究分担 | 応微・酵素利用研 |
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| パーマリンク | https://agriknowledge.affrc.go.jp/RN/3030049286 |
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| 収録データベース | 研究課題データベース |
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