（１）発生分化に関する因子と機構の解明に関する研究

課題番号	2008010722
研究機関名	農業生物資源研究所
研究期間	2006-2010
年度	2008
大課題	３）家畜の発生分化・行動の生体制御機構の解明
中課題	（１）発生分化に関する因子と機構の解明に関する研究
小課題	（１）発生分化に関する因子と機構の解明に関する研究
大項目	第２国民に対して提供するサービスその他の業務の質の向上に関する目標を達成するためとるべき措置
中項目	１．試験及び研究並びに調査
摘要	１．生殖細胞特異的遺伝子の下流側の発現制御領域の解明が進み、雄生殖細胞特異的発現ベクターの構築等に着手するところである。また、FKBP6によるリボゾーム生合成調節機構の解明も、ほぼ予定通り進捗している。２．ブタ原始卵胞由来の成熟卵母細胞と屠場由来の成熟卵母細胞の融合卵を作製し、体外受精を施した結果、13.3%が胚盤胞へ発生し、その細胞数は33.4±6.1個であった。この成績は無操作の場合（発生率1%）と比べて、格段に改善された。３．家畜改良センターと共同して、BMPが胚発生に及ぼす影響を培養系で検討し、BMP中和抗体によって低下した胚発生率が、組換えBMPタンパク質により回復することを示した。この知見は培養系改善に応用可能であると考えられる。また、ウシ胎盤形成や子宮修復の評価手法としてIV型コラーゲンのレベルを末梢血でモニターする測定系を開発した。４．ウシ胚の伸長培養系の改良を進めるとともに遺伝子発現解析を行った結果、体外伸長胚においても、ある程度体内での発生・分化の過程を再現できていると推察された。５．マウスES細胞の未分化性に関わるPpet21遺伝子の欠損胚はヘテロ及び野生型と比較して発生率に差はなかったが、胚盤胞から脱出胚盤胞にかけて発生が遅延することが明らかとなった。Ppet21に対するモノクロナール抗体を用い、細胞画分に対するウェスタンブロット及び免疫組織学的解析を行った結果、Ppet21タンパク質は細胞質と細胞膜/オルガネラに多く局在していることが明らかになった。６．新しい家畜繁殖技術開発の基盤となる家畜に由来する多能性幹細胞の樹立に取組み、ウサギES細胞、ウシ及びブタで胚盤胞由来未分化細胞株が得られ、ウサギES細胞では、遺伝子導入手法を確立した。さらに、子牛精巣からCD44/c-kit陽性細胞をソートすることにより、未分化な生殖細胞が濃縮されることを明らかにしている。
研究分担	（独）農業生物資源研究所,動物科学研究領域,生殖機構研究ユニット（独）農業生物資源研究所,動物科学研究領域,生殖機構研究ユニット（独）農業生物資源研究所,動物科学研究領域,生殖機構研究ユニット（独）農業生物資源研究所,動物科学研究領域,生殖機構研究ユニット（独）農業生物資源研究所,動物科学研究領域,生殖機構研究ユニット（独）農業生物資源研究所,動物科学研究領域,生殖機構研究ユニット（独）農業生物資源研究所,動物科学研究領域,生殖機構研究ユニット（独）農業生物資源研究所,動物科学研究領域,生殖機構研究ユニット（独）農業生物資源研究所,動物科学研究領域,生殖機構研究ユニット（独）農業生物資源研究所,動物科学研究領域,生殖機構研究ユニット（独）農業生物資源研究所,動物科学研究領域,生殖機構研究ユニット（独）農業生物資源研究所,動物科学研究領域,生殖機構研究ユニット（独）農業生物資源研究所,動物科学研究領域,生殖機構研究ユニット
協力分担関係	国立大学法人岩手大学独立行政法人家畜改良センター
予算区分	技会交付金研究イノベーション創出事業文科省［科研費］文科省・ＪＳＴ競争的資金
業績	(1)Bi-maternal embryonic stem cells can differentiate into cardiomyocytes (2)Excess estrogen sulfoconjugation as the possible cause for a poor sign of parturition in pregnant cows carrying somatic cell clone fetuses (3)Metal mesh vitrification (MMV) method for cryopreservation of porcine embryos (4)In vitro development and mRNA expression in bovine nuclear transferred embryos derived from early G1 or G0 phase cells (5)In vitro maturation and development of porcine oocytes cultured in a straw or dish using a portable incubator with a CO2 chamber (6)Role of matrix metalloproteinase in endometrial remodelling during attachment of embryos in the cow (7)Anti-apoptotic roles of prostaglandin E2 and F2α in bovine luteal steroidogenic cells (8)Mouse Shh is required for prechordal plate maintenance during brain and craniofacial morphogenesis (9)A new ENU-induced mutant mouse with defective spermatogenesis caused by a nonsense mutation of the Syntaxin 2/Epimorphin (Stx2/Epim) gene (10)Pretreatments of porcine sperm before intracytoplasmic sperm injection affect quantity of PLCζ (11)妊娠初期のウシ末梢血白血球における遺伝子発現の解析 (12)Changes in plasma concentrations of inhibin, estradiol-17b, progesterone, LH and FSH associated with follicular waves during the estrous cycle in sows (13)Different epigenetic status of bovine interferone-tau gene in trophoblast and non-trophoblast cells (14)Development of polyspermic embryos in IVP systems of farm animals (15)Polyploidy in porcine embryos produced in vitro (16)Establishment of toxicogenomics platform with oligonucleotide array and trophoblast cell line (BT-1) for studying endocrine disruption in the cow (17)16Kプロラクチン様の反芻動物胎盤性プロラクチン関連タンパク質の発現と生成 (18)ウシ子宮内膜における腫瘍壊死因子発現と局所機能調節 (19)Delayed cleavage of pig embryos after Intracytoplasmic Sperm Injection (ICSI) relates to an ability of blastocyst development (20)ウシ栄養膜細胞由来細胞増殖分子の解析 (21)フローサイトメトリーを用いた子ウシ精巣由来生殖細胞の濃縮と解析 (22)ブタICSI胚における発生能への卵割遅延の関与 (23)卵核胞顕微移植によるガラス化保存されたブタ卵核胞の減数分裂能の検討 (24)ウシプロラクチン関連タンパク質1の発現制御におけるDNAメチル化の関与について (25)ポリエチレングリコール(PEG)によるブタ卵胞刺激ホルモン(pFSH)の化学修飾とPEGylated pFSHの生理活性 (26)ウシ伸長期胚における遺伝子発現動態の解析 (27)ブタ発情周期中における卵巣の周期的変化と末梢血中ホルモン動態の関連 (28)新規ウシ栄養膜細胞系樹立の試みとその特徴 (29)Biological and immunological characteristics of porcine follicle-stimulating hormone chemically modified with a polyethylene glycol derivative (30)Metabolic consequence of congenital asplenia caused by the Dominant hemimelia mutation in mice (31)Expression of extracellular matrix metalloproteinase inducer and its related extracellular matrix degradation enzymes in the bovine endometrium during estrous cycle (32)Identification of multiple quantitative trait loci affecting the size and shape of the mandible in mice (33)Global gene expression profiling in proliferating and differentiating bovine trophoblast cells (34)A novel growth retardation and abnormal gonad morphology locus on mouse chromosome 4 (35)Genetic dissection of testis weight in a mouse strain having an extremely large testis: major testis weight determinants are autosomal rather than Y-linked on the basis of comprehensive analyses in Y-chromosome consomic strains (36)Live piglets derived from in vitro-produced zygotes vitrified at the pronuclear stage (37)Induction of endogenous interferon tau gene transcription by CDX2 and high acetylation in bovine nontrophoblast cells (38)Affected homologous chromosome pairing and phosphorylation of testis specific histone, H2AX, in male meiosis under Fkbp6 deficiency (39)The characterization of DNA methylation-mediated regulation of bovine placental lactogen and bovine prolactin-related protein-1 genes (40)Genome-wide gene expression profiling of bovine follicles: Identification of genes involved in the growth of dominant follicles by microarray analysis (41)Roles of BMP15 and GDF9 on the in vitro maturation, fertilization and following development of bovine oocytes (42)Selective continuation of postimplantation development in simultaneous transfer at different stage mouse embryos (43)Generation of porcine diploid blastocysts after injection of spermatozoa grown in nude mice (44)Nuclear replacement of in vitro-matured porcine oocytes by a serial centrifugation and fusion method (45)Gelatinase (MMP-2 and -9) expression profiles during gestation in the bovine endometrium (46)Leydig cell hyperplasia in an ENU-induced mutant mouse with germ cell depletion (47)Endocrine status and development of porcine testicular tissues in host mice (48)Cardiomyocytes can be generated from parthenogenetic embryonic stem cells
パーマリンク	https://agriknowledge.affrc.go.jp/RN/3030093470
収録データベース	研究課題データベース

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