(4)動物を用いた有用物質生産技術の開発とモデル家畜の作出

(4)動物を用いた有用物質生産技術の開発とモデル家畜の作出

課題番号2010014991
研究機関名農業生物資源研究所
研究期間2006-2010
年度2010
大課題1)バイオテクノロジーによる有用物質生産技術の開発
中課題(4)動物を用いた有用物質生産技術の開発とモデル家畜の作出
小課題(4)動物を用いた有用物質生産技術の開発とモデル家畜の作出
大項目第2 国民に対して提供するサービスその他の業務の質の向上に関する目標を達成するためとるべき措置
中項目1.試験及び研究並びに調査
摘要1.乳汁中への物質分泌量の増加を目指して、雌ヤギ皮膚由来線維芽細胞及び胎子線維芽細胞にネオマイシン耐性選択マーカーを挿入したBACベクター(200kb)を導入したところ、耐性細胞の出現頻度は両線維芽細胞で同程度(〜10-5)であったが、選択培養中に増殖を停止する場合が少なくなかった。得られた耐性細胞では、導入遺伝子の一部欠損やコピー数が1以下となるモザイク状態を示すものが多かった。目的の遺伝子導入を確認した組換え細胞について核移植実験を継続している。2.組換えニワトリ作出法において鍵となっている始原生殖細胞の培養法と宿主胚の生殖巣への導入法の改善を目指して、各種条件検討を行ったところ、始原生殖細胞は、フィーダー細胞上での培養及び浮遊培養ともに、2か月以上維持することが可能となった。また、フィーダー細胞を用いた培養法では約50%、浮遊培養法では約10%の宿主胚の生殖巣で、移植した始原生殖細胞由来の細胞の存在が確認された。3.これまでに開発した再生医療研究用(GFP発現)や異種移植研究用(糖鎖切断酵素、補体制御因子)、疾患(癌遺伝子発現、高脂血症)モデルブタに加えて、今年度はヒト癌治療への外挿を可能とする代表的癌抑制遺伝子ノックアウトモデルブタの作出に成功した。4.肝臓における免疫応答に重要な役割を果たすクッパー細胞の機能解明のため、前年度に開発した手法を用いてマウス初代肝細胞の混合培養系よりクッパー細胞を単離し、ヒトc-myc遺伝子を含むレトロウイルスベクターを感染させ、マウスクッパー不死化細胞株を樹立した。5.動物実験代替法への実用化を目指して、コラーゲンビトリゲル薄膜のみを貼ったチャンバーを開発してヒト角膜上皮細胞株(HCE-T)を多層化培養することでヒト角膜上皮モデルを構築し、細胞の多層化や細胞間接着など上皮バリア機能の形態学的特徴を確認した。また、このモデルに眼刺激性の異なる化学物質を曝露した場合、刺激性の強弱に応じて経上皮電気抵抗値(TEER)が変化することを見い出し、眼刺激性の定量的評価に応用できる可能性が示された。
研究分担(独)農業生物資源研究所,動物科学研究領域,遺伝子組換え家畜研究センター
(独)農業生物資源研究所,動物科学研究領域,遺伝子組換え家畜研究センター
(独)農業生物資源研究所,動物科学研究領域,遺伝子組換え家畜研究センター
(独)農業生物資源研究所,動物科学研究領域,遺伝子組換え家畜研究センター
(独)農業生物資源研究所,動物科学研究領域,遺伝子組換え家畜研究センター
(独)農業生物資源研究所,動物科学研究領域,遺伝子組換え家畜研究センター
(独)農業生物資源研究所,動物科学研究領域,遺伝子組換え家畜研究センター
(独)農業生物資源研究所,動物科学研究領域,遺伝子組換え家畜研究センター
(独)農業生物資源研究所,動物科学研究領域,遺伝子組換え家畜研究センター
(独)農業生物資源研究所,動物科学研究領域,遺伝子組換え家畜研究センター
(独)農業生物資源研究所,動物科学研究領域,遺伝子組換え家畜研究センター
(独)農業生物資源研究所,動物科学研究領域,遺伝子組換え家畜研究センター
(独)農業生物資源研究所,動物科学研究領域,遺伝子組換え家畜研究センター
(独)農業生物資源研究所,動物科学研究領域,遺伝子組換え家畜研究センター
協力分担関係独立行政法人理化学研究所
国立大学法人京都大学
静岡県畜産技術研究所中小家畜研究センター
国立大学法人名古屋大学
プライムテック株式会社
埼玉県 
茨城県畜産センター
予算区分技会交付金研究 イノベーション創出事業 委託・先端技術[動物ゲノム] 技会・その他 文科省[科研費] その他
業績(1)新しいコラーゲンビトリゲルチャンバーを利用したヒト角膜上皮モデルの構築とその眼刺激性試験への応用
(2)シンポジウムの概要
(3)組織シートおよび器官様プレートの再構築に有用な新しいコラーゲンビトリゲル膜とその移植
(4)
(5)Angiopoietin-1/Tie2 signal augments basal Notch signal controlling vascular quiescence by inducing delta-like 4 expression through AKT-mediated activation of β-catenin
(6)The activation of P2X7 receptor induces cathepsin D-dependent production of a 20-kDa form of IL-1β under acidic extracellular pH in LPS-primed microglial cells
(7)Ploidy assessment of porcine haploid and diploid parthenogenetic embryos by fluorescent in situ hybridization detecting a chromosome 1-specific sequence, Sus scrofa Mc1 satellite DNA
(8)Enhancement of phagocytotic activity by prion protein in PrP-deficient macrophage cells
(9)
(10)Cold stress induced morphological microglial activation and increased IL-1β expression in astroglial cells in rat brain
(11)A β-synuclein mutation linked to dementia produces neurodegeneration when expressed in mouse brain
(12)The neuronal differentiation factor NeuroD1 downregulates the neuronal repellent factor Slit2 expression and promotes cell motility and tumor formation of neuroblastoma
(13)A novel isolation method for macrophage-like cells from mixed primary cultures of adult rat liver cells
(14)A novel isolation method for macrophage-like cells from mixed primary cultures of adult rat liver cells
(15)Isolation and characterization of macrophages from a mixed primary culture of bovine liver cells
(16)Preferential migration of chicken primordial germ cells to left germinal ridge after transfer into recipient embryos
(17)Spermatogonial stem cells
(18)Reversible conversion of epithelial and mesenchymal phenotypes in SV40 large T antigen-immortalized rat liver cell lines
(19)In vitro culture of chicken primordial germ cells isolated from embryonic blood
(20)Morphological characteristics of symmetrically developed ovaries in a 17-day incubated chicken embryo
(21)A simple recovery of viable gonadal germ cells (GGCs) in domestic chickens
(22)Gamma-irradiation induces P2X7 receptor-dependent ATP release from B16 melanoma cells
(23)Overexpression of Wiskott-Aldrich syndrome protein (WASP) N-terminal domain inhibits inflammatory responses in LPS-activated macrophages
(24)Development of a human corneal epithelium model utilizing a collagen vitrigel membrane and the changes of its barrier function induced by exposing eye-irritant chemicals
(25)A simple culture method of chicken blastodermal cells for germline transmission
(26)Detection of the EGFP sequence in breast muscle of 3-year-old chicken after transfection using sonoporation
(27)The CD34 surface antigen is restricted to glucagon-expressing cells in the early developing bovine pancreas
(28)Development of a human cornea model utilizing a collagen vitrigel membrane as a scaffold and its advantages
(29)Alternative animal testing of skin sensitization test using three-dimensional human skin model involving dendritic cells
(30)Development of in vitro skin sensitization test using three-dimensional human skin model consisting of dendritic cells, keratinocytes and fibroblasts on collagen vitrigel membrane
(31)Advantages of the human corneal epithelium model reconstructed in a collagen vitrigel chamber and its application to eye irritation test
(32)Adiponectin is produced by microglial cells: a possible a negative regulator of inflammation in the brain
(33)P27受容体阻害剤Brilliant Blue Gは持続感染細胞におけるプリオン増殖を阻害する
(34)
(35)T細胞のIL-2産生シグナルにおけるWASPの分子機構の解析
(36)コラーゲンビトリゲルチャンバー内に構築したヒト角膜上皮モデルの特徴とその眼刺激性試験への応用
(37)新しいコラーゲンビトリゲルチャンバーを利用したヒト角膜上皮組織シートの再構築と眼刺激性試験への応用
(38)コラーゲンビトリゲル薄膜を利用したヒト角膜上皮モデルの開発とその眼刺激性化学物質の暴露によるバリア機能の変化
(39)プラスチック保護膜付属型コラーゲンビトリゲル薄膜による創傷治癒促進効果
(40)コラーゲンビトリゲルを用いた分化型培養皮膚シート移植による表皮再生
(41)分化型培養皮膚シート移植による表皮再生
(42)A new method for isolating viable gonadal germ cells from 7-day-old chick embryos
(43)Celastrol suppresses morphological and transcriptional responses in microglial cells upon stimulation with double-stranded RNA
(44)貪食細胞の貪食にはPLD4が関与する
(45)
(46)In vitro culture of testicular and ovarian gonocytes obtained from 19-day incubated chicken embryos and subsequent colonization into gonads of recipient embryos
(47)コラーゲンビトリゲルを用いた気管粘膜再生
(48)コラーゲンビトリゲル薄膜を培養担体に用いた培養角膜モデルの開発状況とその特徴
(49)A method for cryopreserving semen from Yakido Roosters using N-methylacetamide as a cryoprotective agent
(50)
(51)Ettan DIGEシステムによるクローンブタ肝臓由来ミトコンドリア蛋白質発現差異解析
(52)樹状細胞を含む3次元培養ヒト皮膚モデルを用いた皮膚感作性試験代替法
(53)化学物質の動態解析への応用を指向した新しいコラーゲンビトリゲルチャンバーの開発
(54)新しいバイオマテリアル:取扱い性に優れたコラーゲンビトリゲル膜乾燥体
パーマリンクhttps://agriknowledge.affrc.go.jp/RN/3030162492
収録データベース研究課題データベース

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